6月28日-30日南农猪会开启！往届回顾：非瘟流行形势与检测技术研究进展

自2018年非洲猪瘟进入中国，国内猪场经历了恐慌、清栏、生物安全、复养……虽然损失惨痛，但积累的经验也是宝贵的。猪场生物安全体系全面重塑，猪场管理能力在危机中提升，猪场环境和设备也升级更新。专家普遍认为我国非洲猪瘟流行日趋复杂，急性伴随慢性是大趋势，因此生物安全目前仍是非洲猪瘟的主要防控手段。

南农猪会总结非瘟防控之战的最新经验，每年都会推出最新的研究进展。在此，收集整理往届南农猪会上，非瘟防控方面带来的精彩报告，温故知新，以便同行学习参考。

2024年6月28日-30日，第八届南农猪业大会暨2024钟山猪业展览会即将在南京如期举行。期待更多精彩报告，敬请关注。

我国非洲猪瘟流行特征和防控形势

扈荣良研究员（军事兽医研究所）

非洲猪瘟病的的变异

迄今为止24个基因型

EP153L和CD2v (EP402L)：血吸附特性变异

HuB20株：我国自然变异株

LYG18株：我国第一个基因缺失株，80%以上死亡

JX21：多个部位缺失或插入，没有CD2v的缺失，但因突变提前终止，没有凝血性，多个位点的碱基变异，症状不显，应激加重。

未来预测：更多变异株出现、强度变弱、耐药变异、免疫逃避株、产生新的基因型的可能性

我国非洲猪瘟的防控

1. 降低乃至消除环境中病毒载量，降低发病率，实时监控，减少传染源病猪出圈

2. 切断传播途径

3. 通过不同方式的生物安全养殖，保护易感动物

4. 逐步开展SPF（无ASFV）环境创立，走净化之路

5. 流行严重地区适时推出安全的疫苗

6. 鼓励选育和推广抗病品种

非洲猪瘟疫苗研究

1. 活疫苗

(1) 自然致弱株病毒

(2) 细胞适应致弱株

2. 灭活疫苗：佐剂是关键

3.亚单位疫苗

我国非洲猪瘟流行日趋复杂，急性伴随慢性是大趋势

生物安全目前仍是非洲猪瘟的主要防控手段

加快安全有效疫苗研究和应用，降低环境中ASFV载量是我国乃至全球非洲猪瘟防控研究面临的主要任务

非洲猪瘟净化应是我国非洲猪瘟防控必由之路

我国非洲猪瘟流行动态

吴晓东研究员（国家非洲猪瘟参考实验室主任）

非洲猪瘟疫情形式

1、世界非洲猪瘟流行态势

2021年非洲猪瘟继续在全球扩张：中美洲再次发生疫情、欧洲新发疫情、亚洲新发疫情；

OLE数据：2021年全球26个国家和地区通报发生2924起家猪和7771起野猪疫情。

2、我国非洲猪瘟流行态势

截止2022年，中国共计发生疫情195起（家猪189起，野猪6起）

2021年，我国8个省份报疫情14起，累计病死1015头，扑杀3561头；

上述疫情中12起与生猪调运有关，1起疫情为复养失败（海南）。

3、非洲猪瘟当前流行特点

疫情零星散发，多由活猪调运引起；

病毒分布范围依然较广，不同地区均有分布；

进入秋冬季节，以及南方进入两季，感染情况明显增多；

农贸市场、无害化处理场、屠宰场病毒污染较为严重；

流行毒株呈现复杂化。

非洲猪瘟病毒（包括变异株）当前流行情况

1、传入中国毒株属于基因Ⅱ型、血清8型；

2、非洲猪瘟变异株发生明显变化：基因组序列、致病力等明显变化；

3、多省阳性样本基因组序列测定和分析：部分样本存在无明显人为引入的大片段缺失或重组；

4、非洲猪瘟变异株常见变异位点。

非洲猪瘟检测技术研究与应用现状

1、非洲猪癌变异株检测监测技术

ASFV基因缺失毒株检测技术：三重荧光PCR检测技术；

ASFV基因I、Ⅱ型鉴别检测技术：普通PCR扩增测序、荧光RAA检测、荧光OCR检测；

ASFV自然变异株监测技术：高变异基因进行扩增分析、全基因序列测定比对分析。

2、美国越南疫苗ASFV-G-ΔI177L评价

在猪巨噬细胞的增殖能力降低：与母本毒株 Georgia 2007 相比生长动力学降低；

免疫后存在长时间病毒血症：ΔI177接种后存在高滴度病毒血症、口鼻免疫/攻毒仍存在低滴度病毒血症；

可在猪体内连续传代：随着在猪体内连续传代其复制水平逐渐增强；

免疫后攻毒血液中未检测到强毒株。

非洲猪瘟防控措施建议：非洲猪瘟无疫小区

1、政策引领：2019年国务院办公厅《关于加强非洲猪瘟防控工作的意见》——2021年农业农村部《非洲猪瘟等重大动物度病分区防控工作方案》（试行）；

2、法律法规、标准体系完善：防疫法、评估管理办法、管理技术规范、评分表、评审要素判定等均已完善；

3、建设成效：全国已有27个省份累计建成115个非洲猪瘟无疫小区；

4、下一步工作：加快构建分区防控、无疫区与无疫小区、净化场“三位一体”的新型区域化管理新格局。

非洲猪瘟流行新态下场内阻断传播的思考与建议

李金龙教授（东北农业大学动物医学学院）

李金龙教授认为，随着猪价的上涨，2022年对于养猪行业是一个变革的时代。在这场变革中，有三个至关重要的关键词值得我们去学习认知：高标准的生物安全将已成为养猪生产中生猪疾病防控的杀手锏；“全进全出（AI/A0）”生产方式将已成为养猪生产中最有效阻断疾病传播的防火墙；“全进全出（AI/A0）”生产方式成效取决于猪场内精准消毒程序的执行达标率。

非洲猪癌疫情流行新态势

1、演变新趋势

基因Ⅱ型野毒强毒株；

高致病性变异毒株；

低致病性基因缺失变异毒株；

基因Ⅰ型与Ⅱ型同时出现。

2、流行新趋势

野毒强毒与低致病性变异毒株同时流行；

变异毒株隐蔽性强；

非瘟多毒株同时存在；

感染后可28天以上无症状；

呼吸系统成为变异毒株病毒重点侵害对象。

3、野毒强毒感染临床症状变化

过往认知认为感染强毒的症状包括厌食、呕吐、身体发红、发烧；母猪流产；重症无任何症状突然死亡；妊娠母猪突然死亡；肥猪大猪突然死亡等。而今的变异毒株隐蔽性强，早期感染少有典型临床症状或呈无症状感染；侵袭对象也主要为呼吸系统、骨髓和胎盘等。

4、最新趋势

哈兽研在山东和河南地区均分离到了基因Ⅰ型非瘟病毒，且均为低毒力毒株；

两株基因Ⅰ型毒株均无血吸附活性；

与上世纪葡萄牙的基因Ⅰ型低致死毒株 NH/P68和OURT88/3 高度相似；

与欧洲及非洲早期的基因1型强毒株L60和Benin 97 存在较大差异。

猪场双向生物安全策略

1、切断传染病流行链条

消灭传染源；

切断传播途径；

增强易感群体抗病力。

2、避免错误思想

李金龙教授表明，过度使用消毒药等错误的思想会带来更多的隐患，只有科学使用才是王道。以火焰消毒为例，用猪肉和软骨作为受试对象，结果显示因开启火焰消毒设备激发的灰尘会导致更大的感染风险。

3、双向思维，内外兼修

外部防控：生物安全，从人员意识做起；

内部防控：阻断常态化传播风险，从猪舍改造做起。

场内阻断病毒传播防控建议

场内净化根除；

生物安全隔绝病毒；

超早期防范预警；

提高健康度；

精准防控、降本增效。

非洲猪瘟抗体检测数据解读与应用

黎先伟 法国IDvet现场技术支持经理

ASFV基本知识概述

1、病原学特点

非洲猪瘟病毒为线性双链 DNA病毒，共计1个血清型，9个血清亚群，24个基因型（B646L基因分型），不同基因型之间交叉保护性差。其主要的靶细胞是巨噬细胞和单核细胞A，不诱导中和抗体或水平低下。

2、编码蛋白

基因组编码共151～167种蛋白质，成熟的病毒粒子包含54种结构蛋白，重要编码及其功能如下表：

3、非洲猪瘟疫苗

越南已上市ASFV-G- △I177L非洲猪瘟疫苗，其安全性和有效性有待商榷。

ASFV抗体监测必要性

1、猪场为什么要测非瘟抗体？

中国目前强弱毒株同时存在（基因缺失株、自然弱毒株、自然变异株等），“弱毒株”；

具有潜伏期更长：无症状感染，致病性弱、死亡率低：非典型临床症状，Ct值变化：排毒量低、呈间歇性阳性特点，因此弱毒株感染存在漏检的可能。

2、不测非瘟抗体会给猪场带来什么影响？

弱毒株潜伏期长，临床症状不明显，核酸检出率低，间接性排毒；

ASF大流行过去，在抗体和免疫功能的选择下，非瘟病毒出现变异是可能的；

西班牙非瘟参考实验室指出，在ASF呈地方流行的区域，确诊可疑病例最好用标准的血清学试验（ELISA）；

猪感染无致病力或低致病力毒株时，血清学试验（ELISA）也许是检测感染动物的不可或缺的途径。

ASFV抗体监测思路

1、猪场如何监测非瘟抗体？

筛选：基于半纯化病毒抗原的间接ELISA或采购商品化ELISA试剂盒；

确诊：基于半纯化病毒抗原的免疫印迹；基于E70毒株感染传代细胞的间接免疫荧光；免疫过氧化物酶试验 。

2、猪场如何选择适合的非瘟抗体试剂盒？

检测目的——初筛：提高真阳性的检出率，即提高诊断的敏感性，适用于阳性拔牙场、早期诊断、从外引种、日常监测；

检测目的——复核：提高真阴性的检出率，即提高诊断的特异性，适用于感染中后期（耐过猪）、日常监测、可疑样本复检；

试剂盒性能：特异性、敏感性、重复性、品牌、包被蛋白、生产工艺等；

样本类型选择：血清、血浆、口腔液样本等。

ASFV抗体结果判读

1、弱毒株核酸检出率低，若发现非瘟抗体阳性猪，且经复检均为阳性，即使没有临床症状，也建议淘汰处理。

2、“拔牙”猪群对出现临床症状的发病栋舍采集口腔液样本进行检测。

3、结合临床综合判定

核酸、抗体检测结果与临床生产情况相结合；

对同一动物的不同部位（如口鼻拭子、血液、胎衣、脐带血等）采样检测，尤其是针对异常猪；

对于存在争议的样本，建议间隔3-5天后进行采样复检；

建立猪场风险评估体系。

第八届南农猪业大会暨2024钟山猪业展览会

2024年6月29日-7月1日南京

期待精彩继续