为了评价温呼平对母猪蓝耳病的防治效果,将304头发病母猪随机分为两组,每组107头,实验组从怀孕85天起长期添加温呼平直至产后7天,同时对照组和实验组于怀孕85天各添加替米考星连用15天,结果显示实验组母猪流产8头,对照组流产头数为35头,实验组母猪平均产子数为12头,均重1.3kg,对照组平均产子数为8头,均重0.9kg。实验组和对照组抗体S/P值均处于下降趋势,但抗体离散度实验组下降17.5%,对照组下降11.6%。表明温呼平能改善蓝耳病毒引起的母猪生殖系统疾病,降低流产率,改善仔猪出生头数,提高仔猪出生重,同时降低蓝耳抗体离散度,对蓝耳病防控有一定作用。
猪蓝耳病(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪后引起的一种严重危害养猪业的传染病,主要引起母猪早产、流产、死胎、木乃伊胎、严重的肺炎、水肿和结膜炎,引起仔猪的呼吸系统疾病等,尤其蓝耳病能够引起免疫抑制导致的混合感染和继发感染从而导致更高的死亡率。
近年来,世界范围内PRRSV流行趋势日渐严重,美国2020年10月到2021年年初报道的PRRS1-4-4毒株,以其极快的传播速度和高致死率引发行业关注,我国自1996年报道经典毒株以来,变异株、NADC30-Like、NADC34-Like先后被发现,目前我国蓝耳病流行情况以地方流行性为主,但是往往同一地区,同一猪场存在多个不同流行毒株,不断有新的基因型出现,基因型更加复杂,严重威胁我国养猪业的健康发展。
中药因为毒副作用低,抗病毒效果明确,被广泛用于预防和治疗病毒性传染病,近年来越来越多具有抗病毒效果的中药获得了试验和临床治疗证据,被不断应用于临床。研究证明[1]体外板蓝根多糖能够阻断PRRSV的复制并且能够直接的杀灭作病毒,甘草酸能通过调节病毒蛋白和细胞受体等阻止病毒感染[2]。本文通过复方中药对蓝耳病的临床防治试验,从临床症状和抗体离散度方面评价了中药温呼平(通用名芩黄颗粒,洛阳惠中兽药有限公司提供)在蓝耳病防治中的作用,为临床温呼平的使用提供理论支撑。
- 材料和方法
1.1试验动物和场地
猪群及试验场地由四川成都大邑县某猪场提供。该猪场为蓝耳阳性不稳定场,场中母猪出现流产、死胎,保育猪呼吸道症状明显,生长缓慢并且有不同程度的死亡。猪瘟、伪狂犬病原检测为阴性,流产胎儿能检出蓝耳病原。
1.2主要仪器设备
酶联免疫检测仪:Thermo公司Multiskan FC型酶标仪:
1.3主要药品与试剂
温呼平(通用名芩黄颗粒,洛阳惠中兽药有限公司提供);勇乐(20%替米考星,由洛阳惠中兽药有限公司提供);PRRS X3 试剂盒购于美国IDEXX公司
1.4试验动物分组与处理
母猪随机分为两组,每组107头。实验组于配种后85天开始添加温呼平直至产后7天,对照组不加中药,两组分别在配种85天用20%替米考星拌料1kg拌料1吨,连用15天。记录两组母猪流产头数,仔猪出生重和母猪平均产子数。于配种85天和产后第7天随机选择15头母猪颈静脉采血,ELISA测母猪蓝耳抗体水平。
1.5抗体检测
所采全血样品凝固后,待有血清析出,4000 r/min离心10 min,取血清存放于1.5 ml的EP管。参照IDEXX公司生产的 PRRS X3 诊断试剂盒操作说明书进行血清样品的检测,并进行结果的判定(S/P值小于0.4判为抗体阴性;S/P值大于或等于0.4判定为抗体阳性)。
- 结果与分析
2.1温呼平对母猪生产性能的影响
用药后实验组流产母猪头数8头,流产率为7.48%;对照组为35头,流产率为32.17%。实验组平均产子数为12头,对照组为8头。结果见表1。
注:流产率=流产母猪头数/母猪总头数*100%。
2.2温呼平对出生仔猪均重影响
猪场受蓝耳影响,整体出生重偏低,实验组107窝仔猪平均出生重为1.3kg,对照组为0.9kg,见表2。
表2:温呼平对仔猪出生均重的影响
2.3温呼平对母猪蓝耳抗体水平的影响
实验组用药前抗体s/p平均值为1.75,抗体离散度为40.2%,抗体阳性率为100%,见图1。图2所示为对照组用药前抗体s/p平均值为1.76,抗体离散度为41.4%,抗体阳性率为100%,。用药后实验组s/p平均值为1.56,抗体离散度为22.7%,见图3。对照组s/p平均值为1.63,抗体离散度为29.8%,见图4。
3、讨论
PRRSV感染可分为三个阶段:急性感染、持续感染和病毒消除,发生持续感染时,病毒复制能力下降,只在局部淋巴组织中进行复制,除淋巴结和扁桃体外病毒无法被检测到,同时临床症状消失,但在淋巴组织中复制的病毒可排出体外而传染给健康猪群,这是 PRRSV 难以防控的原因之一。PRRSV感染所引起的抗体依赖性增强作用(ADE)是PRRSV免疫抑制的另一特征,低水平的特异性抗体所发挥的作用是促进PRRSV感染而不是抑制感染,另外存在免疫抑制和免疫逃避等,总之PRRSV的这一系列病原特性为它的防控带来极大的挑战。目前对于该病的防控还没有特别有效的方法,但是包含药物和疫苗两个方面,临床上主要使用PRRSV活苗或弱毒苗进行免疫预防,弱毒苗免疫效果较好,但本身存在散毒危险。而灭活苗由于引起的体液免疫应答不完全,免疫效率不高。药物压制主要是泰万菌素和替米考星为主,但是周期长成本高,这次实验表明单独使用替米考星15天,母猪流产率依然高达30%以上,保育猪呼吸道疾病多发而反复,保育阶段猪群生长缓慢,对猪场造成严重经济损失。
研究表明[3-4]有些中药中含有对PRRSV生命周期不同阶段具有显著抗病毒作用的生物活性成分,它们通过不同的机制发挥抗PRRSV作用,如直接杀灭病毒颗粒、阻断病毒吸附和穿入细胞、抑制病毒RNA的复制、抑制病毒颗粒的组装和释放以及通过增强机体免疫调节的作用等。例如体外板蓝根多糖对PRRSV具有直接的杀灭作用[1,5];体外黄芩苷能显著抑制PRRSV感染Marc-145 细胞,抑制率为56% ~ 59%,且该抑制效果呈非时间依赖性[6];甘草酸虽然不能明显减少PRRSV吸附 Marc-145 细胞且对PRRSV 的复制和病毒颗粒释放过程无影响,但能通过改变细胞膜的流动性来抑制病毒的穿入过程[2]。
温呼平主要成份包括黄芩、板蓝根、麻黄、甘草、山豆根、桔梗等,精选道地药材,通过低温动态真空提取技术、真空浓缩技术以及沸腾制粒等方法制作而成,临床上主要用于病毒性呼吸道疾病的防治。本文结果表明添加温呼平的实验组母猪流产8头,流产率为7.48%,未添加温呼平的对照组母猪流产率高达32.17%;添加温呼平后母猪平均产子数为12头,均重1.3kg,对照组平均产子数为8头,均重0.9kg,表明温呼平能显著提高蓝耳阳性母猪生产性能。虽然实验组和对照组抗体S/P值均处于下降趋势,但添加温呼平后抗体离散度下降17.5%,对照组仅下降11.6%,表明温呼平能明显改善母猪抗体离散度。因此温呼平和替米考星连用比单独使用替米考星对母猪生产性能的恢复和蓝耳的快速稳定效果更理想。
参考文献
[1]王学兵,张红英,崔保安等.板蓝根多糖对PRRSV的体外抗病毒试验.西北农业学报,2009,18(1):198-200.
[2]胡安君,毕亚楠,杨婉莉.甘草酸体外抗PRRSV的作用机制.中国兽医学报,2018,38(7):1386-1393.
[3]褚秀玲, 韦旭斌.抗病毒中草药研究进展. 中兽医学杂志,2006, 1:33-38.
[4]管远红, 赵旭庭, 王健等,中药防治猪繁殖与呼吸综合征的研究进展. 黑龙江畜牧兽医,2012, 19:28-30.
[5]刘樱,丁度伟,高求炜,梁嘉琪,冼琼珍等。 3种中药及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究。 中国畜牧兽医,2016.,43(10):2730-2735.
[6]雷芳. 黄芩苷药理作用研究进展.中国药业,2010,19(015):87-88.
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