欧阳小珍：避免假阴，样本处置是核酸检测关键技术点【2020防非扩产峰会】

11月12日，由温氏股份、硕腾联合冠名的新猪派2020防非扩产峰暨首席兽医官私享会正式开幕，上海基灵生物科技有限公司技术服务总监欧阳小珍就非洲猪瘟核酸检测方案进行了讲解，并就动物疫病常用检测方法与基灵生物ASFV解决方案进行了分享。

上海基灵生物科技有限公司技术服务总监欧阳小珍
 

ASFV检测的金标准：PCR及实时荧光定量PCR核酸检测。

动物疫病常用检测方法包括病原学检测、免疫学检测、核酸检测。欧阳小珍表示，病原学检测优点是准确，也是疫病诊断的金标准；但缺点也很明显，比如耗时、对操作条件要求高、阳性率低、风险大（人兽共患病）。

同样的，免疫学检测方法也很多，如：酶联免疫吸附试验（ELISA）（口蹄疫等多种疫病高通量检测）；凝集试验（布鲁氏菌病、沙门氏菌病等）；血凝试验与血凝抑制试验（禽流感、新城疫等）；胶体金免疫层析技术（俗称试纸条）等。其优点是操作简便、无需特殊仪器设备、结果显示快速；缺点是不同方法对不同疫病特异性和敏感性差别较大，容易造成漏诊或误诊。

峰会现场

她还表示，核酸检测技术，包括了：PCR及实时荧光定量PCR、LAMP等恒温扩增技术、分子杂交试验、基因芯片等。PCR及实时荧光定量PCR，用在OIE所有的区域参考实验室，被认为是ASFV检测的金标准。
核酸检测优点很多，如：快速、灵敏度高、特异性强；用于动物疫病的早期诊断；有效减少生物安全风险，作为病原学检测的辅助手段；能够同时检测多种病原；能够进行快速基因分型。缺点是需要一些特殊设备，对人员有一定技术要求，外界因素可能对实验结果造成干扰。

欧阳小珍作非瘟核酸检测关键技术点分析报告

欧阳小珍表示，ASFV核酸检测的关键技术点，是样本的采集、保存、运输。采样组织以及样品的保存、前期处理等建议参照相关动物疫病诊断技术对应的国家标准或OIE Terrestrial Manual，对唾液、鼻咽拭子可置于样本保存液中，避免核酸降解造成假阴性。

上海基灵的核酸检测方案分享

基灵ASFV核酸检测方案中，核酸提取方法有滤膜分离法（离心柱法）、Excycle-EP 磁珠法核酸提取仪等。滤膜分离法（离心柱法）的优点是：无需添加蛋白酶K；提取核酸纯度高，同类产品中耗时短；适用于样本量不多时使用。

而Excycle-EP 磁珠法核酸提取仪，它的优势则更为明显。包括：最大裂解体系，最大裂解体系为2ml；可获得更高的核酸提纯效率；多规格预封装试剂，解放客户的双手、减少人为操作产生的失误；优化的温控体系，受热面积更大、加热效率更高；网络数据传输应用的是InHub数据管理系统。

基灵ASFV核酸检测方案Excycle-EP 磁珠法参数与性能

欧阳小珍还列举了磁珠法核酸提取在设备上的主要优势，包括：

Ø适合常见类型样本，包括血清、血浆、唾液、各种拭子洗液、组织匀浆液、样本保存液和粪便中等所含病毒核酸的提取；

Ø试剂盒灵敏度高，结果稳定且重复性好；

Ø试剂盒仅需室温保存；

Ø磁珠回收率高：≥98%；

Ø试剂盒批内和批间差均<5%；

Ø预分装规格多样，有16T/板、10T/板、5T/板、1T/条4种规格，方便实用；

Ø洗脱试剂位于5/11列，降低污染概率。

基灵ASFV核酸检测实时荧光PCR仪参数与性能

欧阳小珍表示，基灵全自动核酸提取系统获得了客户广泛认可，目前已有30余项专利（含申请中）；是全球兽医诊断领域唯一拥有生化、免疫、细胞学和分子诊断四大技术平台。希望能成为全球创新兽医诊疗领域的引领者，继续保持开放创新、成就客户；谦逊诚信、同心远行价值观，成就用科技关爱每一个生命的使命。

上海基灵在峰会上展出的检测等相关设备
 

据悉，本次大会还得到了温氏股份、硕腾、四川海林格生物制药有限公司、自然集团、佛山市正典生物技术有限公司、广州迈微生物科技有限公司、内蒙古必威安泰生物科技有限公司、广州悦洋生物技术有限公司、宁波三生生物科技有限公司、上海基灵生物科技有限公司、吉林正业生物制品股份有限公司、广西扬翔股份有限公司、金蝶软件（中国）有限公司广州分公司、广东广垦畜牧集团股份有限公司、广州玉龙科技有限公司、中山市白石猪场有限公司、广西园丰牧业集团股份有限公司、青岛易邦生物工程有限公司、广州力智农业有限公司、江西加大集团有限公司、深圳市京基智农时代股份有限公司、福州微猪信息科技有限公司、浙江博信药业股份有限公司、肇庆市益信原种猪场有限公司、山东华辰制药有限公司、山东滨州沃华生物工程有限公司、广东德兴食品股份有限公司、宁波科瑞特动物药业有限公司、广东爱苏生物科技有限公司、成都兴旺动物药业有限公司、广州动福源畜牧设备有限公司、福建永诚农牧科技集团有限公司、意大利亚士可化工大药厂、法国诗华动物保健公司、长沙道勤生物科技有限公司、宁波第二激素厂等36家国内外优秀企业的大力支持！