猪回肠炎的现状及其防控策略
孙春清,王红岩,黄律
勃林格殷格翰动物保健(上海)有限公司
摘要
猪回肠炎(Ileitis)又称猪增生性肠病 (PPE)、区域性回肠炎、出血性坏死性肠炎、肠腺瘤病等,是由胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)引起的一种以顽固性或间歇性下痢为特征的消化道疾病。可引起保育猪或生长育肥猪出血性或非出血性腹泻,使感染猪生长速度减慢,猪群生长均匀度和饲料转化率变差,有时引起死亡。目前全球猪场中胞内劳森菌的感染率非常高,对猪群采集合适的样品进行检测,可以确定感染状态及感染时间,同时帮助猪场确定干预的时间。恩特瑞猪回肠炎活疫苗是国内唯一的猪回肠炎疫苗,免疫方式安全、方便,可有效减少猪出血性肠炎造成的后备种猪及育肥猪的死亡率,是防控该病的最有效措施。
1病原
胞内劳森菌为弯曲或直的弧状杆菌,长约 1.25 ~ 1.75m,宽约 0.25 ~ 0.43m。该菌是严格的 细胞内寄生菌,通过获取细胞线粒体的三磷酸腺苷,来供给自身的生长繁殖。该菌属于微需氧菌,需要在微量的氧气浓度环境(如回肠)中繁殖。5~15℃ 粪便中的胞内劳森菌在空气中 2 周仍有感染力,低温环境下可存活22周,对甲醛、过氧乙酸、火碱等常用消毒剂有一定抵抗力,但对季铵盐和含碘消毒剂敏感。
2流行病学
直接接触是本病主要的传播方式,病猪、带菌猪是主要的传染源。已经发现病猪、亚临床感染猪可以从粪便中排出大量细菌,污染猪栏和猪场的其它区域,通过粪―口途径传播引起感染。哺乳仔猪感染的传染源可能是母猪。除了病猪外,尚有一些传播媒介在回肠炎传播过程中发挥作用,可在啮齿动物如鼠体内繁殖并传播。工作人员的服装、靴子和器械均可携带本菌。各种应激反应,如转群、混群、过热、过冷、昼夜温差过大、湿度过大、密度过高,频繁引进后备猪,过于频繁的接种疫苗,突然更换抗生素造成菌群失调等因素可诱发回肠炎。潜伏期7~21天,感染剂量越高、潜伏期越短。
欧洲、亚洲和北美许多国家的猪场流行率研究表明,调查猪场中有四分之一到一半的猪场都有严重的回肠炎问题。血清学和PCR研究数据表明,在大多数国家, 超过90%的猪场携带胞内劳森菌。德国阳性猪场比例为91.7%;丹麦为95.8%;西班牙为83.3%;法国为79.2%;荷兰为91.7%;英国为100% ;美国为90.9%;加拿大为95%;韩国、马来西亚、泰国都为100%;日本为94%;菲律宾为86%;越南为77%。回肠炎已成为一种世界性疾病。
在中国,大量的田间血清学调查结果表明,被检猪场的阳性率极高,其中3~4周龄和8~10 周龄猪的阳性率较低,从13周龄开始阳性率增加,18和24周龄阳性率最高达90%,后备母猪和母猪阳性率高达50%~100%。
曲向阳等利用商品化的胞内劳森氏菌快速检测试剂盒对来自21个规模化猪场采集的321 份粪便样品进行胞内劳森氏菌检测。经检测21个规模化猪场100 %存在回肠炎感染,而且感染率随着猪只日龄增长而逐渐升高。4周龄仔猪即存在感染,感染率为9.1 %,8 周龄(41.5 %)~10 周龄(67.9 %)为主要感染开始期,12 周龄(94.3 %)~14 周龄(87.9 %)为感染高峰期,所检测样品的总体阳性率为59.81 %,强阳性率为31.2 %,结果表明,华东地区规模化猪场普遍存在亚临床型回肠炎感染。
我们收集了广西、河南、广东、浙江、福建、湖北、江西、河北、北京、上海规模在150-7000头之间54个猪场, 2700个血清样品做血清学调查。结果表明中国阳性的育肥猪场比例为98%,阳性的母猪场为74%。
3临床症状及病理变化
猪回肠炎按照临床表现分为急性型、慢性型和亚临床型。
急性回肠炎:多发于4~12月龄育肥猪、后备猪以及年青母猪,猪群发病率一般2~5% ,表现急性出血腹泻, 病程稍长时, 粪便由出血红染发展到黑色柏油样粘稠稀便;发病猪出现贫血, 皮肤苍白,精神萎靡;喜卧扎堆,死亡率可达15~50%,感染猪只发病快、死亡率高。病变常发生于回肠末端和近端结肠,表现为肠管增厚、肿胀,黏膜增厚和浆膜水肿。急性回肠炎的另一个变化是回肠和结肠的管腔常含有一个或多个大的血凝块。直肠可能含有黑色、煤焦油样粪便(图1、图2、图3),混有血和消化的食物。肠道感染部位黏膜有显著增生性增厚。
图 1 急性回肠炎导致肠管增厚,肠道有血凝块,直肠有煤焦油样粪便(来自J.Pohlenz)
图 2 急性回肠炎猪只呈现血便症状
图 3 急性回肠炎:隐窝不规则分支,充满细胞碎片,表面坏死(来源:J.Pohlenz)
慢性回肠炎:常发于8~16周龄猪只,猪群发病率达25%~30%。临床表现轻微, 同一栏内个别猪呈间歇性下痢, 粪便变软、变稀或呈糊状, 甚至水状, 有时粪便中混有血液或肠道坏死组织碎片。发病猪表现食欲减退, 精神沉郁, 弓背弯腰, 被毛粗乱, 皮肤苍白, 并逐渐呈渐进性消瘦;病猪腹泻持续时间3天到3个月不等,采食量减少,日增重降低,猪群整齐度差(图4)。若猪症状较轻或无继发感染, 大部分发病猪可在4~10周之后逐渐康复。常见病变位于小肠末端60cm和邻近结肠的上1/3处,肠黏膜增厚形成脑回样皱壁(图5、图6)。
图 4 患病猪只呈现水样粪便
图 5 肠粘膜增厚
图6 慢性回肠炎:肠绒毛变短,隐窝增生(来源:J.Pohlenz)
亚临床型回肠炎:多发于6~20 周龄猪,症状 轻微或无明显腹泻症状;也可能发生轻微下痢但并不引起人们注意;猪只生长速度和饲料利用率下降。感染猪临床症状轻微或无明显的临床腹泻症状;日增重减少, 采食量降低, 出栏时均匀度差(图7、图8)。 剖检可见回肠粘膜增生性病变,在回肠末端 50cm 处和结肠前 1/3 处的肠粘膜增厚,有的整个肠壁变厚、变硬,像一条橡胶管,有的还可见溃疡,肠粘膜表面覆盖有黄色、灰白色纤维素性渗出物,严重的可见肠道内充满血凝块与坏死。
图7 亚临床感染猪只生长速度缓慢,猪群整体均匀度差
图8水泥浆样粪便
4检测与监测
临床上可通过证实粪便或肠壁组织内含有胞内劳森菌作出临床确诊,通常采用的方法是用胞内劳森菌的特异性引物进行 PCR 检测或采用兔的高免血清中的多克隆抗体或抗胞内劳森菌的特异性单抗进行免疫学试验等。对有临床症状的猪只,采集回盲瓣15厘米处2-3厘米小肠段,进行组织病理学和免疫组化检测,是确诊是否为回肠炎感染的金标准。
对猪群中回肠炎的监测,尤其是亚临床感染情况下,通常采用血清学和PCR检测相结合,来判断猪群中胞内劳森菌的感染动态。市场上有商品化的荧光定量试剂盒和ELISA试剂盒应用。通常针对目标群体,根据置信水平和猪群预估流行率,采集对应数量的血清样本进行ELISA检测,或肛拭子及粪便样本进行PCR检测。根据检测的目的,采样周期可以从8-10周龄开始,每隔3-4周采集一次,直至出栏(图9)。需要注意的是,血清中的IgG可以在感染后约2周被检测到,但其持续时间会受机体免疫状态、疾病发展的严重程度及敏感抗生素的使用等影响。胞内劳森菌的感染呈现间歇性排菌,且粪便样本中存在大量核酸抑制物质及竞争DNA,如果样本处理不当,会影响检测结果。所以,血清学检测比粪便PCR能够更加灵敏的体现是否有感染及感染的时间,并帮助确定采取干预的时间。目前也有一些研究证明,对不同周龄阶段的猪群采集口腔液,也可以进行胞内劳森菌排菌的检测,其PCR阳性结果与肛拭子的阳性结果相比,一致性达86%。
图 9 通过血清学检测胞内劳森菌感染及确定免疫干预时间的方法
5防控策略
药物防治:所选药物除对病原菌敏感外,还应在肠道上皮细胞内有较高药物浓度,一般的抗生素很难对其发挥作用,常用药物有泰妙菌素和泰乐菌素等。不同猪场的感染形式、感染时间和发病时间都不同, 这就决定了最佳的治疗方案也不同。由于胞内劳森菌只需要较少的剂量就能引起猪群发病,这导致经常会出现由于治疗时机、剂量、感染压力以及抗生素的使用时机不合适而导致的治疗失败,并且抗生素停药后不能阻断再次感染, 所以在中大猪阶段需不断脉冲式用药, 而且长期使用抗生素能使病原菌的耐药性越来越强,容易造成其他细菌的二次感染。随着国家饲料禁抗措施的实施,药物防治越来越表现其局限性。
免疫接种:实践证明疫苗免疫是防控该病的最有效措施。恩特瑞猪回肠炎活疫苗,模仿自然的口服感染途径,宿主的免疫系统以更“自然”的方式暴露生物体的所有抗原特性,完全激发T细胞的免疫反应,可以提供最佳保护,具有高效和免疫持续时间长的优点。它通过复制和扩增抗原 刺激先天免疫,当所有的抗原都呈现出来时,诱导最好的体液和细胞反应,口服免疫,安全、方便,对于后备猪及繁殖种猪群也可通过饮水或拌料的方式免疫。在疫苗接种3周后开始产生保护力,而临床感染通常需要约3周的时间血清转阳。因此,为了能够在临床感染发生前,猪群得到疫苗的有效保护,通常在血清转阳前至少6周进行疫苗接种。
正确地接种猪回肠炎活疫苗,可保护猪群长达24周以上至育肥结束,减少因治疗回肠炎造成的抗生素的使用,改善因亚临床感染导致的生产成绩下降,提高猪只均匀度和日增重。全球大量田间试验数据表明,免疫猪回肠炎活疫苗后,不同的猪场饲养管理条件下日增重可提高十几克至几十克,缩短出栏时间,减少抗生素的使用(见表1)。后备母猪接种猪回肠炎疫苗后,通过长时间的跟踪监测发现,疫苗免疫可有效预防后备猪入群后的回肠炎爆发,提高后备猪的育成率。加拿大一项连续3年跟踪8家大型种猪场的田间观察结果表明,后备猪接种猪回肠炎活疫苗后的回肠炎爆发率从2002年的1%逐年下降,至2005年下降至0.057%,免疫接种过的后备猪甚至长达3.5年不出现回肠炎的临床症状(见表2,表3)。
表 1 Andres Bulay 就中国、日本等亚洲多个猪场使用恩特瑞猪回肠炎活疫苗控制回肠炎的生产指标进行多元分析结果汇总
表 2 Sanford等2002-2005年跟踪加拿大8个后备母猪群免疫恩特瑞猪回肠炎活疫苗后的效果
表 3 John Kolb 等汇总美国多个恩特瑞猪回肠炎活疫苗效果评估的田间试验结果
生产管理:在隔离驯化期内每月添加敏感的抗菌药物 7~10天。加强饲养管理,执行全进全出(严格冲洗、消毒和坚持一定的空栏时间)和严格的消毒措施(碘 或季铵盐类消毒剂消毒有效)对于降低回肠炎的危害程度有一定作用,但很难净化回肠炎,干净的猪群更易发生急性出血性回肠炎。
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